DETERMINACIÓN DE FENOLES TOTALES EN PROPÓLEOS DE LA PROVINCIA DE SANTIAGO DEL ESTERO

Por: José F. Maidana Mónica Rodríguez y Ana Ma. Chazarreta

 Introducción

 El propóleos es una sustancia elaborada por un grupo especializado de individuos de la colonia de abejas. Los miembros de este grupo, recolectan varios productos bio­lógicos, existentes en las yemas y ramas jóvenes de los árboles, así como en el pecíolo de las hojas.

Las abejas realizan estas operaciones en los días calu­rosos, con temperaturas superiores a 20° C y entre las 10 a 15 horas aproximadamente. La composición química del producto es compleja, reuniendo sustancias aromáticas, bálsamos, flavonas, sustancias minerales, etc.

Muchos componentes de la fórmula química del propó­leos, siguen aún sin determinar. En la existencia de las colonias de abejas, el propóleos desempeña un papel de gran importancia, ya que asegura la perfecta pureza e higiene de la colmena o del hueco del árbol que abriga a la colonia, Apimondia ( 1976).

Lavié, citado por Chauvin ( 1976) y Philippe (1988), ha demostrado que en el interior de la colmena existe una película a base de propóleos que impide la proliferación de gérmenes. Los efectos de este producto pueden deducirse de lo siguiente: si en la colmena penetra un cuerpo ajeno o un enemigo (ratones, lagartos, etc.) las abejas le inyec­tan veneno para matarlo y después envuelven los restos con propóleos, cubierto a su vez con cera. E1 cadáver momi­ficado de esta manera, no se pudre y los tejidos resisten sin descomponerse durante años.

De este hecho, bien conocido por los apicultores, resulta que el propóleos tiene efectos antiproteolíticos ( Protéosis. Proceso por el cual las proteínas se hidrolizan y desdoblan bajo la influencia de ciertos agentes químicos)

Bactericidas ( Que destruye las bacterias ) y bacteriostáticos ( Se aplica a las sustancias que impiden o inhiben la multiplicación y el desarrollo de las bacterias), sin equivalentes entre las sustancias naturales con acción farmacodinámica conocidas hasta el día de hoy. El propóleos es uno de los productos apícolas de mayor eficacia en lo que concier­ne a los principios activos transmitidos de la planta al hombre.

Por la presencia de numerosos principios activos en el propóleos, tomados de las plantas de procedencias, la acción y los campos de empleos terapéuticos de esta sus­tancia, resultan sumamente amplios, Apimondia ( 1976).

La composición química del propóleos varia mucho según su origen.

Según Ghisalberti y col. ( 1978), los constituyentes mayo­ritarios del propóleos son el pterostilbeno, xanthorrhoeol, sakuranetina y pinostrobina.

Una treintena de constituyentes del propóleos tienen una estructura química conocida, y han sido aislados e identificados. Entre los constituyentes, Lavie ( 1977), cita seis compuestos aislados simultáneamente en propóleos y bálsamos de álamos. El propóleos contiene también ácido benzoico y fenólico. Según Bankova y col. ( 1982), los fla­vonoides, constituyentes principales de resinas y bálsa­mos, representan el 35% de los compuestos del propóleos del sur de Bulgaria, con la siguiente composición: pino­cembrina 21,4%; galangina 5%; crisina 4.8%; quercetina 2,2% y tectocrisina l,1 %. Los análisis realizados por Belestrieri y Marini (1987) sobre muestras de propóleos rumanos, dan en porcentaje los siguientes valores: aceites esenciales: 6,5; resinas y bálsamos: 51.3%; ceras: 34.7%; polen: 3.5% y otros constituyentes: 4%. Para estos auto­res, los constituyentes mayoritarios del propóleos son de naturaleza fenólica (principalmente flavonoides), y no con­tienen proteínas, ácidos nucleicos, lípidos, hormonas ni vitaminas (salvo el grupo PP).

Según estudios de Lavie ( 1968), el extracto de propóleos tiene efectos bacteriostáticos al menos sobre 30 cepas microbianas. Para Metzner y col. ( 1979), las propiedades antimicrobianas del propóleos son principalmente debidas al contenido en flavonoides, principalmente pinocembrina, galangina y pinobanksina, entre otros.

Dadas estas propiedades, existen medicamentos a base de propóleos para el tratamiento de quemaduras y llagas, dermatosis, faringitis, rinitis, traqueitis, gingivitis, prosta­titis, infecciones de las vías urinarias y úlceras, así como antiséptico y bactericida bucal.

En medicina veterinaria es utilizado para cicatrizar heridas, tratamiento de abscesos, quemaduras y dermato­sis (Smirnov y Kazaskov, 1957).

La farmacopea actual menciona su uso como hipocoles­terolemiante o reductor de la tasa de colesterol en sangre por

el hecho de disminuir la absorción de las grasas a nivel intestinal.

En el presente trabajo de investigación, se han reco­lectado muestras de propóleos en bruto de diferentes apiarios de la provincia de Santiago del Estero, a fin de analizar el contenido de fenoles totales, teniendo en cuenta que estos componentes son los compuestos activos del propóleos responsables de la mayoría de sus propiedades benéficas, y de esta manera poder valorar su calidad y establecer criterios para su control.

Este estudio, contribuye a un conocimiento detallado del propóleos de la República Argentina para su futuro empleo y aplicación en campos como la medicina humana, medicina veterinaria, industria alimentaría, cosmética, agricultura e industrias varias. Con un detallado conocimiento de las propiedades físico-químicas del propóleos se optimizará su aprovechamiento y cuidado en el manejo, procesamiento y conservación del producto, para su explotación a escala industrial.

 Material y métodos

Como primera medida, se eligió al Departamento Capital de la Provincia de Santiago del Estero para efectuar el estudio.

Se realizó un relevamiento de los apiarios existentes en dicha zona y se eligieron aquellos en óptimas condiciones: atención permanente por parte del apicultor, buen estado sanitario de la colonia (libre de enfermedades), material apícola en buenas condiciones y provisión normal de miel, polen y resinas.

De los 10 apiarios seleccionados, cada uno de ellos con un número de 20 a 50 colmenas, se eligieron las que tení­an depósitos de propóleos adheridos en todas las partes de su estructura. Finalmente, de estas últimas (4 ó 5 colme­nas por apiario), se eligieron dos al azar y de cada una sé tomó una muestra por raspado con espátula, representa­tiva de todas sus partes: cabezal y laterales de los cuadros, piso, paredes de las alzas, piquera y techo.

 TABLA 1

  Las muestras fueron guardadas "in situ” cada una dentro de una bolsa de polietileno de color negro con un rótulo donde se anotó el número de orden y todas las muestras ubicadas dentro de una caja de cartón, para su traslado al laboratorio de análisis donde fueron guardadas en refrigeración a 4° C hasta su estudio.

Se confeccionó una planilla de control, donde se detalló é1 número de orden y la procedencia de la muestra, núme­ro de colmena de donde se las extrajo y nombre de las espe­cies vegetales arbóreas y arbustivas de las cercanías del apiario, como posibles fuentes de resinas para la abeja. En otra hoja, se registraron detalles sobre las muestras referi­dos a su aspecto, peso, color, olor y sabor.

 Acondicionamiento de las muestras

Antes de efectuar el análisis en el laboratorio, se acondiciona­ron las muestras para el ensayo: se fraccionaron las mismas en trozos de un cm de diámetro y se colocaron en refrigerador por 24 horas para solidificarlas.

Luego, se trituraron los trozos en un mortero, se mezclaron para su homogeneización y finalmente se tomó la cantidad adecuada (1g.), por triplicado, para realizar la determinación.

 Determinación

El método empleado permite cuantificar los compuestos fenólicos totales presentes en el propóleos, y se expresan como equivalentes de ácido gálico. Se basa en la reacción de oxidación de los fenoles y la aparición de una colora­ción azul, por acción del reactivo fosfotúngstico.

Paralelamente se determinó la fracción útil del propóleos (porcentaje de resinas totales), mediante extracción con alcohol etilíco, filtración y posterior evaporación del mismo, y el índice de oxidación midiendo el tiempo de decoloración de una solución de permanganato de potasio con una solución alcohólica de propóleos, para poder esta­blecer las posibles correlaciones entre estos parámetros y el contenido de fenoles totales.

Resultados  y discusión

 De las determinaciones efectuadas a las 20 muestras por triplicado, luego de obtener el valor promedio, se encontró .

que los resultados del contenido de fenoles varían dentro de un rango muy amplio de 0° al 30%  (Tabla 1 ).

De las muestras analizadas, el 80 % de las mismas  corresponden a colmenas ubicadas en lugares con vegeta­ción nativa, con gran variedad de especies vegetales arbóreas y arbustivas. .

Con respecto a los caracteres organolépticos de las mismas, el 90% presenta un color marrón oscuro o verdoso y sólo el 10%, es de color verde oscuro. El 30% posee un olor resinoso aromático y el 50%, es insípido (Tabla 1).

Para poder establecer si existe alguna relación entre el contenido de fenoles, la fracción útil del propóleos (Resinas - Totales), y el índice de oxidación, el cual es un parámetro de calidad establecido por reglamentaciones internaciona­les, se efectuaron paralelamente los análisis para cuantificar resinas y determinar la velocidad de oxidación (Tabla

2, Gráfica 1 ). Del análisis de los datos, surge una correlación entre el contenido de fenoles totales e índice de oxi­dación y la curva obtenida es del tipo exponencial decreciente de primer orden. Esto permite, a través de la determinación del índice de oxidación, establecer un valor estimativo del porcentaje de fenoles totales en la muestra de propóleos, y por lo tanto la calidad del mismo.

Tabla 2

 Contenido de resinas totales, fenoles totales e índice de oxidación de las muestras de propóleos.           

 Tabla 3

Origen vegetal, caracteres organoléptico y contenido de fenoles totales de muestras de propóleos de otras provincias